D-Luciferin Firefly D-熒光素（鈉鹽/鉀鹽/游離酸）
簡要描述：
D-Luciferin Firefly D-熒光素（鈉鹽/鉀鹽/游離酸）應用：常用于體外研究，包括熒光素酶和ATP水平分析；報告基因分析；高通量測序和各種污染檢測。目前市場上有三種產(chǎn)品形式，D-熒光素（游離酸），D-熒光素（鈉鹽），和D-熒光素（鉀鹽）。
產(chǎn)品時間：2024-03-21
打印當前頁D-Luciferin Firefly D-熒光素（鈉鹽/鉀鹽/游離酸）注意事項
1）螢火蟲熒光素（firefly luciferin）和甲蟲熒光素（beetle luciferin）皆相同化合物，即：(S)-2-(6-Hydroxy-2- benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylic acid，僅不同公司在命名上的差異。
2）螢火蟲熒光素（firefly luciferin）在保存和操作的過程中需要避光。另，水溶性儲存液經(jīng)過濾除菌后，可置于-20℃或-80℃分裝凍存，避免反復凍融。若條件允許，對儲存液充氮氣或氬氣（防止氧化），穩(wěn)定性和保存時間更長，長達1年。
3）螢火蟲熒光素（firefly luciferin）的注射方式，以及動物類型、體重等都會影響熒光信號發(fā)射，建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線，確定zuijia信號平臺期和zuijia檢測時間。
4）紫外線和潮氣會產(chǎn)生脫氫熒光素，是一種熒光素酶的競爭性抑制劑。因此需小心保存和處理D-熒光素。-20℃避光干燥保存。
5）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
D-Luciferin Firefly D-熒光素（鈉鹽/鉀鹽/游離酸）使用方法
A．體外生物發(fā)光檢測
1. 儲存液制備
【注意】：建議大量實驗前先取少量原料（D-熒光素游離酸）溶于你的緩沖液，以測試其溶解性。
【配置方法】：要溶解螢火蟲熒光素游離酸到生理鹽中，首先用NaOH或KOH調整緩沖液到預測的摩爾堿度，然后加入D-熒光素游離酸（如15mg/ml），邊攪拌邊促進溶解。如果仍有沉淀，調整pH到更高直至*溶解。zui后用酸調整pH到所需值。混勻后立即使用或分裝于-80℃避光凍存，避免反復凍融。
2. 熒光素酶反應緩沖液制備
2.1 配方【1×，參考Yuichi Oba, et al., 2003】：100mM Tris-HCl（pH 7.8），5mM MgCl2，250µM CoA，150µM ATP。具體緩沖液組成可參考其他文獻資料來調整。按照以上配方制備熒光素酶反應緩沖液（2×）。
3. 收集細胞裂解上清（熒光素酶表達）
根據(jù)需要檢測的細胞類型，選擇合適的裂解液進行細胞裂解，離心收集上清后續(xù)檢測待用。
4. 螢火蟲熒光信號檢測
【注①】：螢火蟲熒光信號的檢測方法大體上取決于冷光測定儀（luminometer）類型（是手動型熒光計、單管注射型或者酶標板讀數(shù)型熒光計）。根據(jù)特定發(fā)光測定儀，來考慮注射用量和程序設置。
【注②】：需設置不含熒光素酶的孔（用作陰性對照），以測定背景熒光。
例：注射式冷光測定儀（injectible luminometer，單樣或微孔板，200µl終體積）
a）吸取100µl熒光素酶反應緩沖液（2×）到一干凈的冷光測定儀比色皿或96孔板的各孔（使用全白平底的96孔板）；
b）吸取50~98µl裂解上清到皿或孔內(nèi)；
c）如果有需要，用水來補足使得總體積到198µl；
d）設置程序注射2µl熒光素儲存液（使工作濃度150µg/ml），程序：2~5秒延遲（delay），之后10s測定。
B．活體成像分析
1）工作液準備：準備少量的PBS（w/o Mg2+）, pH=12以及PBS（w/o Mg2+）, pH=2緩沖液。先取10mg D-熒光素游離酸到165ml PBS（w/o Mg2+）, pH=12，充分溶解后，再加入165ml PBS（w/o Mg2+）, pH=2中和溶液，混勻得到30mg/ml的工作液。0.2µm濾膜過濾除菌。混勻后立即使用或分裝于-80℃避光凍存，避免反復凍融。一旦使用，放到4℃解凍，保持冰冷且避光。
2）注射方式：適用于靜脈注射，腹腔注射，肌肉注射和鼻內(nèi)注射等，根據(jù)具體方式調整注射體積，zui常用的注射濃度為150mg/kg體重。
3）檢測方式：注射入體內(nèi)10-20 min（待光信號達到zui強穩(wěn)定平臺期），再進行成像分析。
【注意】：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線，從而確定zui高信號檢測時間和信號平臺期。
| 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格（元） |
| MX4601-250MG | D-Luciferin Firefly, Free Acid D-螢火蟲熒光素（游離酸） | 250mg | 1800 |
| MX4601-500MG | D-Luciferin Firefly, Free Acid D-螢火蟲熒光素（游離酸） | 500mg | 3000 |
| MX4601-1000MG | D-Luciferin Firefly, Free Acid D-螢火蟲熒光素（游離酸） | 1g | 5800 |
相關產(chǎn)品：更大包裝或產(chǎn)品技術問題，請來電/在線咨詢，： 。：www.maokangbio。。ｃｏｍ。
| 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格（元） |
| MX4602-100MG | D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光素（鈉鹽） | 100mg | 998 |
| MX4602-500MG | D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光素（鈉鹽） | 500mg | 2500 |
| MX4602-1G | D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光素（鈉鹽） | 1g | 4500 |
| MX4603-100MG | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 100mg | 998 |
| MX4603-500MG | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 500mg | 2500 |
| MX4603-1G | D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素（鉀鹽） | 1g | 4500 |
| MX4604-10MG | DMNPE-caged Luciferin D-熒光素（DMNPE籠閉） | 10mg | 1350 |
| MX4604-50MG | DMNPE-caged Luciferin D-熒光素（DMNPE籠閉） | 50mg | 5440 |
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
D-Luciferin Firefly, Free Acid D-螢火蟲熒光素（游離酸）
搜索關鍵詞：
D-熒光素（D-Luciferin）；Luc報告基因底物；螢火蟲熒光素酶Firefly luciferase；D-熒光素鉀鹽；D-熒光素鈉鹽；生物發(fā)光成像技術（Bioluminescence imaging，BLI）；Luminometer熒光計；CAS NO：2591-17-5；
描述：
D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整個生物技術領域，特別是體內(nèi)活體成像技術。作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下，D-熒光素（底物）被氧化發(fā)光。當熒光素過量時，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關性（見下圖）。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質粒轉染進入細胞后，導入研究動物如大小鼠體內(nèi)，之后注入熒光素，通過生物發(fā)光成像技術（BLI）來檢測光強度變化，從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響，根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。
這三種產(chǎn)品主要差別在于溶解特性。D-熒光素（游離酸）在水以及緩沖體系內(nèi)的溶解性都很弱，除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。但鈉鹽和鉀鹽形式的D-熒光素能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中，使用方便，溶劑無毒性，特別適合體內(nèi)實驗。配成溶液后的三種產(chǎn)品，在絕大多數(shù)應用上都沒有實質性的差別。
基本特性：
1） CAS NO：2591-17-5
2） 化學名：(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid; D-Luciferin Firefly, free acid D-螢火蟲熒光素游離酸，D-甲蟲熒光素游離酸；
3） 分子式：C11H8N2O3S2
4） 分子量：280.32 g/mol
5） 純度：＞99% (HPLC)
6） 外觀：類白色至淺黃色粉末
7） 溶解性：溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50mg/ml），溶于弱堿，微溶于水
8） 化學結構圖：
D-Luciferin Firefly Free Acid D-熒光素游離酸 熒光探針與細胞染色
D-Luciferin Firefly Free Acid D-熒光素游離酸 熒光探針與細胞染色
D-Luciferin Firefly Free Acid D-熒光素游離酸 熒光探針與細胞染色