久久综合999_久久久久国产精品视频_狠狠操狠狠色综合网_91久久久久久久久久久

歡迎光臨上海懋康生物科技有限公司
主頁 > 技術文章 > 用嘌呤霉素篩選細胞的方法你知道么
技術文章
用嘌呤霉素篩選細胞的方法你知道么
  嘌呤霉素是一種蛋白質合成抑制劑,它具有與tRNA分子末端類似的結構,能夠同氨基酸結合,代替氨酰化的tRNA同核糖體的A位點結合,并摻入到生長的肽鏈中。用嘌呤霉素篩選細胞方法如下:
 
  嘌呤霉素篩選細胞
 
  轉染(24孔板進行)或電轉后培養24小時,按10%密度傳代(傳至36mm平皿),繼續培養24小時,待細胞密度增至20%-25%回合時;
 
  去掉培養液,PBS洗一次,加入按照最佳嘌呤霉素篩選細胞的濃度(殺傷曲線試驗確定)配制好的嘌呤霉素篩選細胞培養基2-3ml。
 
  根據培養基的顏色和細胞的存活情況,每隔2天更換一次嘌呤霉素篩選細胞用培養基(培養基用量為2-4ml,細胞多,多家培養基,細胞少,少加培養基),一般在3-1天內出現細胞大量或少量死亡情況(如果轉染效率或電轉效率高,則死亡少;
 
  如果轉染率或電轉率低,則死亡多;如果篩選濃度偏低,嘌呤霉素篩選細胞培養基用量少,細胞密度大于80%,會導致大量假陽性克隆)。
 
  如果少選第一周,出現細胞大量死亡,則在原培養皿中繼續加入嘌呤霉素篩選細胞培養基篩選一周;如果刪選第一周,出現細胞少量死亡,則把細胞按照10%密度傳代(傳至35mm平皿,傳一個皿即可,多余細胞丟棄),利用少選培養基進行篩選一周;
 
  篩選第二周結束后,則把細胞消化下來。進行重點稀釋(10ul培養基中含1個細胞,用篩選培養基),把上述10ul細胞懸液假日96孔板中(提前加入40ul篩選培養基),伊紅加入24孔,4小時候觀察每個孔的情況。記錄只含一個細胞的孔,含有一個細胞的孔用于繼續篩選,其余孔舍棄;
 
  根據培養基的顏色和細胞生長情況換入新的嘌呤霉素篩選細胞用培養基待細胞密度為80%時,將其傳代至24孔板中增殖,待細胞密度為80%時,將其傳代至6孔板中增殖,待細胞密度為80%時,將其傳代至T25瓶(一傳3)中增殖,每隔3天換液。
 
  細胞大量擴增后,一瓶用于提取中RNA進行QPCR檢測,一瓶用于總蛋白進行WB檢測,另一瓶用于保種,根據QPCR和WB結果取舍陽性克隆。
 
  嘌呤霉素篩選細胞方法如上,具體的嘌呤霉素篩選細胞讓發如上,嘌呤霉素穩定性高,可以常溫運輸,收到產品后4℃存放;
 
  嘌呤霉素在室溫條件下可存放3個月,4℃條件下保質期一年。為了達到理想的穩定狀態和最長的保質期,最好存放于-20°C,保質期為2年。
  • © 2019 上海懋康生物科技有限公司 版權所有 技術支持:環保在線
  • 電 話:18616957973 傳 真:86-021-54736159 QQ號碼:1563822900 郵 箱:2971634497@qq.com 地 址:上海市閔行區虹梅南路2588號綠亮科創園1幢A棟321室
  • 備案號:滬ICP備16016464號-3 總訪問量:637528
在線客服 聯系方式

服務熱線

18616957973

久久综合999_久久久久国产精品视频_狠狠操狠狠色综合网_91久久久久久久久久久
911精品产国品一二三产区| 久久久精品欧美丰满| 一区二区不卡在线播放| 在线亚洲精品福利网址导航| 亚洲精选免费视频| 欧美精品在线观看播放| 美女视频黄 久久| 久久尤物电影视频在线观看| 国产v日产∨综合v精品视频| 综合亚洲深深色噜噜狠狠网站| 国产福利视频一区二区三区| 国产精品久久久久久久久免费桃花 | 精品一区二区三区久久久| 久久久午夜精品理论片中文字幕| 国产激情一区二区三区桃花岛亚洲| 国产精品三级电影| 在线观看欧美精品| 麻豆高清免费国产一区| 国产三级一区二区| 一本色道综合亚洲| 日韩精品电影在线观看| 久久久www成人免费毛片麻豆| 99视频在线观看一区三区| 亚洲精品视频在线看| 91.麻豆视频| 国产精品一二三四| 成人免费小视频| 欧美日韩www| 国产一区二区三区国产| 日韩一区在线看| 欧美人体做爰大胆视频| 国产一区二区三区四| 亚洲欧美日韩久久| 日韩一区二区三区免费看 | 在线观看欧美精品| 久久99国产精品久久99果冻传媒| 国产精品主播直播| 亚洲三级在线看| 欧美老女人在线| 福利一区二区在线观看| 亚洲一区二区三区四区在线观看 | 国产真实乱对白精彩久久| 亚洲天堂中文字幕| 日韩欧美高清一区| 一本色道久久综合亚洲aⅴ蜜桃| 日韩精品一级中文字幕精品视频免费观看 | 偷拍与自拍一区| 国产精品女人毛片| 91精品国产综合久久蜜臀| 成人性色生活片| 日韩成人一区二区三区在线观看| 欧美韩日一区二区三区四区| 51精品视频一区二区三区| 粗大黑人巨茎大战欧美成人| 五月婷婷色综合| 国产精品国产三级国产普通话99| 51精品久久久久久久蜜臀| av亚洲精华国产精华| 美国欧美日韩国产在线播放| 亚洲色图视频网| 久久伊人蜜桃av一区二区| 欧美午夜精品一区| 成人午夜精品在线| 麻豆91免费观看| 亚洲在线视频免费观看| 欧美国产激情一区二区三区蜜月| 69堂国产成人免费视频| 97aⅴ精品视频一二三区| 国产一二精品视频| 日本大胆欧美人术艺术动态| 亚洲欧美另类久久久精品2019| 2023国产精品视频| 6080国产精品一区二区| 色天天综合色天天久久| 高清久久久久久| 久久99精品国产麻豆不卡| 亚洲国产精品一区二区www| 国产精品久久久久久久久搜平片| 欧美精品一区二区蜜臀亚洲| 在线不卡的av| 在线观看亚洲一区| 99re8在线精品视频免费播放| 国产一区二三区| 免费观看成人鲁鲁鲁鲁鲁视频| 亚洲最大成人综合| 亚洲欧洲日韩一区二区三区| 国产欧美日韩在线| xnxx国产精品| 精品精品国产高清a毛片牛牛| 欧美日韩国产免费| 欧美在线一二三四区| 亚洲免费看黄网站| 中文字幕精品—区二区四季| 欧美精品一区二区三区蜜桃| 日韩欧美国产精品一区| 777亚洲妇女| 6080国产精品一区二区| 欧美丰满少妇xxxxx高潮对白| 欧美三级视频在线观看| 欧美亚洲国产怡红院影院| 91麻豆成人久久精品二区三区| 成人av在线一区二区| 丁香一区二区三区| 国产成人免费9x9x人网站视频| 久99久精品视频免费观看| 男人操女人的视频在线观看欧美| 五月天精品一区二区三区| 亚洲成在人线免费| 亚洲午夜精品17c| 亚洲午夜国产一区99re久久| 亚洲国产精品综合小说图片区| 亚洲午夜一二三区视频| 亚洲成人自拍网| 无吗不卡中文字幕| 日韩国产精品91| 麻豆国产精品一区二区三区| 激情综合五月婷婷| 国产一区91精品张津瑜| 国产不卡视频在线播放| 成人高清视频免费观看| 99久久精品免费看| 色天使久久综合网天天| 欧美少妇xxx| 91精品在线一区二区| 日韩亚洲欧美中文三级| 日韩免费福利电影在线观看| 欧美一区二区视频在线观看2022| 日韩欧美国产成人一区二区| 久久亚洲一级片| 国产偷v国产偷v亚洲高清| 久久免费电影网| 中文字幕中文字幕在线一区| 亚洲精品高清视频在线观看| 亚洲丰满少妇videoshd| 日本欧美一区二区三区| 国模无码大尺度一区二区三区| 国产成人综合精品三级| 91小视频免费看| 欧美色视频一区| 欧美另类videos死尸| 日韩美女视频在线| 国产欧美日韩另类视频免费观看 | 1024成人网| 亚洲国产一区二区视频| 奇米一区二区三区| 国产成人亚洲综合a∨猫咪| 99久久精品免费看国产| 欧美日韩一区三区四区| 精品日韩成人av| 中文字幕日韩欧美一区二区三区| 亚洲国产精品久久久久秋霞影院 | 日韩电影在线免费| 国产一区二区三区在线观看精品| 北岛玲一区二区三区四区 | 欧美在线视频你懂得| 欧美大片一区二区| 国产精品久久久久毛片软件| 午夜影院久久久| 国产资源精品在线观看| 91美女在线观看| 日韩精品在线一区二区| 国产精品久久久久久久久晋中| 亚洲一区二区美女| 国产真实乱对白精彩久久| 国产精品国产三级国产| 午夜av区久久| 国产91精品一区二区| 欧美无人高清视频在线观看| 久久综合九色欧美综合狠狠| 又紧又大又爽精品一区二区| 美女视频第一区二区三区免费观看网站| 国产成a人亚洲精| 欧美日韩免费观看一区二区三区 | 欧美日韩久久一区| 中文字幕乱码日本亚洲一区二区 | 精品美女一区二区| 一区二区三区四区激情| 国产一区二区三区四区在线观看| 在线视频国产一区| 国产天堂亚洲国产碰碰| 天堂影院一区二区| 不卡的看片网站| 日韩欧美成人午夜| 中文字幕在线一区免费| 麻豆一区二区在线| 色婷婷综合久久久| 国产亚洲一区二区在线观看| 亚洲成年人网站在线观看| 高潮精品一区videoshd| 日韩区在线观看| 亚洲一区二区精品视频| 成人动漫视频在线| 精品日韩一区二区三区| 亚洲成人自拍偷拍| 99国产精品视频免费观看| 久久免费视频一区| 日本欧美一区二区| 欧美在线小视频| 亚洲天堂成人在线观看| 国产福利91精品一区|